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產(chǎn)品簡介

本試劑盒采用 His 標簽純化樹脂來高效完成 His 標簽融合蛋白的體外 pull-down 實驗。實驗前先將目標基因連 入帶有 His 標簽的原核表達載體中，在大腸桿菌中表達出 His 融合蛋白。利用 His 標簽純化樹脂與 His 標簽的強親 和性，純化 His 融合蛋白，再與樣本裂解液孵育，樣本中的互作蛋白即可被吸附而分離。

試劑盒成分

＊注意：該試劑盒包含足夠完成12、24或40個反應的試劑，每個反應使用45 μL 樹脂。由于每次pull-down實驗至少需要設置一個實驗組和一個陰性對照組，因此一次實驗至少需要使用2個反應的試劑量。

額外所需材料

1. 自備材料：表達 His-誘餌蛋白的大腸桿菌（或純化的 His-誘餌蛋白）、表達 His 空載體的大腸桿菌、PBS。

2.所需儀器：混勻儀、低溫離心機、超聲波破碎儀。 

使用說明

I 注意事項

1. 請勿干燥、冷凍或劇烈渦旋樹脂，這些操作會導致樹脂聚集而降低結合能力。

2. 為保證樹脂均勻分布，請在使用前通過反復顛倒、輕微渦旋徹底混勻樹脂。

3. 實驗前需要先做 western blot 實驗確定 His 融合蛋白和待測互作蛋白是否可溶表達。

3. 請務必使用無 RNase 的離心管、槍頭等實驗材料。

4. 在吸取樹脂前，請將移液槍槍頭尖部剪掉 1～2mm。

5. 樹脂的離心步驟需在低速條件下操作，離心速度大于 5000×g 可能會導致樹脂聚集和再懸浮困難。

6. 實驗的具體樣品量和孵育時間依賴于每個特定體系，可能需要優(yōu)化才能得到最大產(chǎn)量。

7. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 

說明書：F1605 His Pull-Down 試劑盒.pdf (196.14 K)