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GST pull down試劑盒
| 貨號(hào) | F1604 | 售價(jià)（元） | 3120/5370 |
| 規(guī)格 | 20T/40T | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
存儲(chǔ) |
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F1604-20 |
GST Pull-Down試劑盒 |
20T |
-20℃ |
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F1604-40 |
GST Pull-Down試劑盒 |
40T |
-20℃ |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本試劑盒采用 GST 標(biāo)簽純化樹脂來(lái)高效完成 GST 標(biāo)簽融合蛋白的體外 pull-down 實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)前先將目標(biāo)基因 連入帶有 GST 標(biāo)簽的原核表達(dá)載體中，在大腸桿菌中表達(dá)出 GST 融合蛋白。利用 GST 標(biāo)簽純化樹脂與 GST 標(biāo) 簽的強(qiáng)親和性，純化 GST 融合蛋白，再與樣本裂解液孵育，樣本中的互作蛋白即可被吸附而分離。
試劑盒成分
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編號(hào) |
名稱 |
20T規(guī)格 |
40T規(guī)格 |
儲(chǔ)存條件 |
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① |
GST 標(biāo)簽純化樹脂 |
950 μL |
1.9 mL |
4℃，1年 |
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② |
裂解緩沖液 |
24 mL |
48 mL |
4℃，1年 |
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③ |
漂洗液 |
70 mL |
140 mL |
4℃，1年 |
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④ |
洗脫緩沖液 |
1.1mL |
2.2mL |
4℃，1年 |
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⑤ |
蛋白酶抑制劑 |
600μL |
1.2 mL |
-20℃，1年 |
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⑥ |
10mL離心管 |
1個(gè) |
1個(gè) |
—— |
＊注意：該試劑盒包含足夠完成12、24或40個(gè)反應(yīng)的試劑，每個(gè)反應(yīng)使用45 μL 樹脂。由于每次pull-down實(shí)驗(yàn)至少需要設(shè)置一個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)陰性對(duì)照組，因此一次實(shí)驗(yàn)至少需要使用2個(gè)反應(yīng)的試劑量。
額外所需材料
1. 自備材料：表達(dá) GST-誘餌蛋白的大腸桿菌（或純化的 GST-誘餌蛋白）、表達(dá) GST 空載體的大腸桿菌（或純 化的 GST 蛋白）、PBS。
2.所需儀器：混勻儀、低溫離心機(jī)、超聲波破碎儀。
使用說(shuō)明
I 注意事項(xiàng)
1. 請(qǐng)勿干燥、冷凍或劇烈渦旋樹脂，這些操作會(huì)導(dǎo)致樹脂聚集而降低結(jié)合能力。
2. 為保證樹脂均勻分布，請(qǐng)?jiān)谑褂们巴ㄟ^(guò)反復(fù)顛倒、輕微渦旋徹底混勻樹脂。
3. 實(shí)驗(yàn)前需要先做 western blot 實(shí)驗(yàn)確定 GST 融合蛋白和待測(cè)互作蛋白是否可溶表達(dá)。
4. 在吸取樹脂前，請(qǐng)將移液槍槍頭尖部剪掉 1～2mm。
5. 樹脂的離心步驟需在低速條件下操作，離心速度大于 5000×g 可能會(huì)導(dǎo)致樹脂聚集和再懸浮困難。
6. 洗脫緩沖液為強(qiáng)酸性，最終的洗脫產(chǎn)物中含有 GST 融合蛋白及其互作蛋白。
7. 實(shí)驗(yàn)的具體樣品量和孵育時(shí)間依賴于每個(gè)特定體系，可能需要優(yōu)化才能得到最大產(chǎn)量。
8. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
說(shuō)明書：
F1604 GST Pull-Down 試劑盒.pdf (212.58 K)
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